EnteroSystem 24R para identificación de enterobacterias

EnteroSystem 24R para identificación de enterobacterias



MicroPlanet presenta un nuevo producto de Liofilchem®, EnteroSystem 24R para identificación de enterobacterias. Es un panel que incluye 24 pruebas bioquímicas desecadas en pocillos para identificar Enterobacteriaceae gramnegativas y oxidasas negativas. Liofilchem ha desarrollado EnteroSystem 24R como evolución del panel EnteroSystem 18R que ofrecía hasta ahora, para responder a la necesidad de nuestros clientes de ampliar la especificidad del abanico de identificación de enterobacterias.

Liofilchem®, su especialista en la identificación microbiológica

Nuestro marca representada Liofilchem® engloba un catálogo que incluye alrededor de 5000 productos centrados en la microbiología. Están principalmente clasificados en dos categorías, microbiología clínica e industrial. Produce paneles de identificación microbiana y antibiogramas, tiras MIC y discos de antibióticos en cartuchos, medios de cultivo deshidratados, suplementos selectivos, medios de cultivo listos para usar en placas o en tubos, botellas, paneles de utilidad en microbiología de alimentos e indicadores biológicos para el control de procesos de esterilización. Y también desarrolla productos personalizados acordes a las especificaciones del cliente o para otras empresas del sector de la microbiología.

EnteroSystem 24R, un paso más respecto al EnteroSystem 18R

Como hemos señalado más arriba, este nuevo sistema es la evolución del EnteroSystem 18R que ofrecía hasta ahora Liofilchem, que incluye 18 pruebas bioquímicas desecadas en pocillos para la identificación de enterobacterias. El 24R contiene 6 tests análiticos más (rammosa, melosa, lactosa, trehalosa, xilosa y dulcitol), además de los 18 que conforman el 18R. Si quiere conocer las especificaciones concretas del panel EnteroSystem 18R le adjuntamos la hoja técnica y el folleto para descarga.

Identificación de enterobacterias Gram-negativas y oxidasa negativas

EnteroSystem 24R es un sistema con 24 pocillos que contiene sustratos bioquímicos deshidratados para la identificación de bacterias Gram-negativas pertenecientes a la familia de las Enterobacteriaceae. Funciona de manera muy sencilla: el panel debe inocularse con la suspensión del microorganismo a analizar, tomado de una colonia pura, y posteriomente incubarse en estufa. Después de 24h, se valora el cambio de color en los diferentes pocillos. El patrón resultante de reacciones positivas y negativas se traduce a un código numérico que será utilizado sucesivamente para la identificación.

Resultados en tres sencillos pasos

  1. Se realizan 24 pruebas diferentes, una por cada pocillo presente en el sistema. La suspensión bacteriana utilizada para inocular los pocillos sirve para reconstituir el medio deshidratado presente en el interior.

EnteroSystem24R 1

  1. El crecimiento bacteriano en los pocillos durante el tiempo de incubación conlleva cambio de color (reacción positiva) que se interpretarán utilizando la Tabla correspondiente.

EnteroSystem24R 4

  1. Se determina el código numérico del microorganismo y se obtiene la identificación final utilizando el software de códigos Liofilchem (lo puede solicitar sin coste alguno). No es necesario instalar un software especial en el ordenador, si lo desea, puede trabajar en formato iCLoud o incluso puede utilizarlo desde su smartphone. Pinche en la siguiente imagen para acceder al ldentification Code Disk de Liofilchem:

Enterosystem24R IdentificationCode

Tabla 24 tests que se realizan con EnteroSystem 24R

Los 18 primeros tests son los mismos y con las misma numeración que en el EnteroSystem 18R (para aquellos que ya estén familiarizados con su uso). Las seis pruebas restantes, del pocillo 19 al pocillo 24, se muestran al final de la tabla: 

 Pocillo  Prueba
 1-ONPG  Hidrólisis del ONPG (Ortonitrofenil-β-D-galactopiranósido)
 2-LDC  Descarboxilación de la lisina
 3-ODC  Descarboxilación de la ornitina
 4-ADC  Descarboxilación de la arginina
 5-PD   Deaminación de la fenilalanina
 6-CIT  Uso del citrato
 7-UR  Hidrólisis de la urea
 8-H2S  Producción de hidrógeno sulfurado
 9-MLN   Uso del malonato
 10-VP   Producción de acetoína (Test Voges-Proskauer)
 11-IND   Producción de indol (Test Kovacs)
 12-GLU   Uso de la glucosa
 13-MAN    Uso del manitol
 14-INO  Uso del inositol
 15-SOR  Uso del sorbitol
 16-SAC  Uso de la sacarosa
 17-ARA  Uso de la arabinosa
 18-RAF  Uso de la rafinosa
 19-RAM  Uso de la ramnosa
 20-MEL  Uso de la melosa
 21-LAC   Uso de la lactosa
 22-TRE   Uso de la trehalosa
 23-XYL  Uso de la xilosa
24-DUL  Uso del dulcitol


Recogida de la muestra

EnteroSystem 24R está indicado para ser utilizado con cualquier muestra clínica o de cualquier otro tipo. El microorganismo a identificar debe ser previamente aislado en un medio de cultivo que favorezca el crecimiento de las enterobacterias, como el MacConkey Agar, Eosin Methylene Blue Agar, Salmonella y Shigella Agar, Hektoen Enteric Agar, o un agar sangre no selectivo (ej. Tryptic Soy Agar con 5% sangre de oveja).

EnteroSystem24R 7

Descripción detallada del procedimiento de prueba con EnteroSystem 24R

Preparación de la suspensión bacteriana

  • El microorganismo a identificar debe haber sido aislado recientemente (18-24 horas) a partir de una colonia pura; las colonias procedentes de cultivos con más de 48 horas pueden dar resultados no esperados.
  • Antes de sembrar el microorganismo a analizar, es necesario realizar la coloración de Gram y el test de la oxidasa. Utilizar EnteroSystem 24R sólo para bacterias Gram-negativas, oxidasa negativas.
  • Picar una o más colonias morfológicamente parecidas, bien aisladas del medio de cultivo sólido y suspenderlas en la solución fisiológica suministrada en el kit (suspensión bacteriana 0.5 McFarland). La suspensión resultante debe utilizarse para sembrar el panel (inoculación) inmediatamente después de su preparación.

Nota: Una gota de la suspensión bacteriana puede utilizarse, antes o después de la inoculación del sistema, para sembrar un tubo de agar inclinado o placa (cualquier medio apropiado) para el control de la pureza.

EnteroSystem24R 2

Inoculación del sistema

  1. Extraer un sistema de su envoltorio y atemperarlo.
  2. Anotar los datos relativos a la muestra y la fecha de comienzo del análisis.
  3. Añadir un disco de "Arabinosa" en el pocillo 17-ARA y un disco de "Xilosa" en el pocillo 23-XYL.
  4. Transferir 0,2 mL de la suspensión bacteriana a cada pocillo del panel y cubrir con 2 gotas de aceite de vaselina los pocillos 2-LDC, 3-ODC, 4-ADC, 7-UR e 8-H2S, para crear un ambiente anaeróbico.
  5. Cubrir el panel con su tapa e incubar a 36±1°C durante 12-18-24 horas.

Interpretación de los resultados

Al concluir el periodo de incubación:

  1. Introducir 2 gotas de alfa-naftol y 1 gota de NaOH 40% en el pocillo 10-VP. Esperar 15-20 minutos después de haber añadido los reactivos antes de realizar la lectura.
  2. Introducir 2 gotas de Reacyivo de Kovac en el pocillo 11-IND. Esperar 1-2 minutos después de haber añadido el reactivo antes de realizar la lectura.
  3. Observar el viraje de color de los pocillos e interpretar los resultados siguiendo la Tabla Interpretativa.
  4. Anotar los resultados en la hoja de resultados y componer el código numérico de 8 cifras siguiendo las instrucciones que se encuentran en la sección FORMACIÓN DEL CÓDIGO NUMÉRICO.
  5. Identificar el microorganismo utilizando el Software Identificativo.

EnteroSystem24R 5

 

Tabla interpretativa

Pocillo

Prueba

Reacción positiva

 Reacción negativa

1-ONPG

Hidrólisis del ONPG

amarillo

incolora

2-LDC

Descarboxilación lisina

rojo

amarillo - naranja

3-ODC

Descarboxilación ornitina

rojo

 amarillo - naranja

4-ADC

Descarboxilación arginina

rojo

 amarillo - naranja

5-PD

Deaminación fenilalanina

negro-marrón

 amarillo

6-CIT

Uso citrato

azul-verde oscuro 

 verde claro

7-UR

Hidrólisis urea

rojo-fucsia 

amarillo - naranja 

8-H2S

Producción hidrógeno sulfurado

negro 

 amarillo

9-MLN

Uso malonato

azul-verde 

 amarillo

10-VP

Test VP

rosa- rojo 

 amarillo

11-IND

Test indol 

rojo 

 amarillo

12-GLU

Glucosa

amarillo  

 azul -verde

13-MAN

Manitol

amarillo  

 azul -verde

14-INO

Inositol

amarillo  

 azul -verde

15-SOR

Sorbitol

amarillo  

 azul -verde

16-SAC

Sacarosa

amarillo  

 azul -verde

17-ARA

Arabinosa

amarillo 

 azul -verde

18-RAF

Rafinosa

amarillo 

 azul -verde

19-RAM

Ramnosa

amarillo 

 azul -verde

20-MEL

Melosa

amarillo

 azul -verde

21-LAC

Lactosa

amarillo 

 azul -verde

22-TRE

Trehalosa

amarillo 

 azul -verde

23-XYL

Xilosa

amarillo 

 azul -verde

24-DUL

Dulcitol

amarillo 

 azul -verde  

 

Formación del código numérico

Las pruebas bioquímicas se dividen en 8 grupos de 3 test y a cada uno se le adjudicará un valor de 1, 2, o 4:

    • Valor 1 : primer test positivo de cada grupo (ONPG, ADC, UR, VP, MAN, SAC, RAM, TRE);
    • Valor 2 : segundo test positivo de cada grupo (LDC, PD, H2S, IND, INO, ARA, MEL, XYL);
    • Valor 4 : tercer test positivo de cada grupo (ODC, CIT, MLN, GLU, SOR, RAF, LAC, DUL);
    • Valor 0 : reacciones negativas de cada grupo.

Se obtiene el código de 8 cifras sumando los valores obtenidos en cada grupo. El ejemplo de abajo nos muestra como se compone un código numérico:

EnteroSystem24R TablaCodigoNumerico

 

Otras consideraciones sobre el EnteroSystem 24R

Control de calidad

Cada lote de EnteroSystem 24R se somete a un control de calidad utilizando los siguentes microorganismos de referencia: Escherichia coli ATCC®, Salmonella Typhimurium, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniaeEnterobacter cloacae

Precauciones de uso y conservación

EnteroSystem 24R no está clasificado como peligroso según la legislación vigente. Para su utilización se aconseja la lectura de la hoja de seguridad. Es un dispositivo desechable para uso exclusivo en diagnóstico in vitro, uso profesional, en laboratorio y por usuarios debidamente adiestrados, con métodos aprobados de asepsis y seguridad frente a los agentes patógenos.

Se aconseja conservar el EnteroSystem 24R a 2-8°C en su embalaje original, alejarlo de fuentes de calor y evitar excesivos cambios de temperatura. Respetando estas condiciones el producto será válido hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. No debe utilizarse pasada esta fecha. Debe eliminarse si se observaran signos de deterioro.

Eliminación de residuos

Después de su utilización, EnteroSystem 24R y el material que ha entrado en contacto con la muestra deben ser descontaminados y desechados de acuerdo a las normas vigentes en el laboratorio para la descontaminación y desechado de material potencialmente contaminado.

 

Work-flow

Workflow Enterosystem24R

Contenido del envase EnteroSystem 24R (ref. 2360071619)

  • 20 Paneles EnteroSystem 24R
  • 20 Viales de Physiological Solution (7.0 mL)
  • 1 Cartucho de Xylose Disc (20 discos)
  • 1 Cartucho de Arabinose Disc (20 discos)
  • Hoja de instrucciones y cuaderno de anotación de resultados

Otros productos necesarios no incluídos:

  • EnteroSystem 18R Reagent (kit de Reactivos para Enterosystem ref. 2360080252): Aceite de vaselina, reactivo test del indol, reactivos test VP.
  • Gram Color Kit (ref. 2360080293): Estándar de Sulfato de Bario 0.5 McFarland.
  • Oxidasa Test Stick (ref. 2360088029)
  • Identification Software online (de libre acceso)

Comparativa EnteroSystem 24R

Existen otros métodos de análisis para identificación de entrobacterias disponibles en el mercado, de entre los cuales el más conocido es el API 20E. Se han relizado estudios internos comparando este producto (y también EnteroSystem 18R) con otros paneles disponibles. En ellos se demuestra que el nuevo EnteroSystem 24R presenta unas características superiores de precisión, sensibilidad y reproducibilidad (por ejemplo para Citrobacter freudii, Hafnia alvei, Morganella morganii, Proteus mirabilis, Salmonella spp. y Shighella sonnei, E.coli, Proteus penneri y Serratia liquefaciens), que lo convierten en una herramienta de identificación muy válida para la confirmación de Enterobacteriaceae en el laboratorio de microbiología.

Esperamos que le haya resultado útil este exhaustivo post sobre el EnteroSystem 24R para identificación de enterobacterias. Si lo desea, puede descargar la ficha técnica del producto. O si lo prefiere, póngase en contacto con nosotros para cualquier duda o detalle sobre este producto. Podemos asesorarle en los mejores productos y herramientas de análisis microbiólogico para su industria o laboratorio.  

 

MicroPlanet: Mejorando la calidad y la productividad en su trabajo

 

 

 

 


BUSCAR

¡Atención! Este sitio usa cookies y tecnologías similares. Si no cambia la configuración de su navegador, usted acepta su uso.